文章目录

1 材料与方法

1.1 试验菌株及动物

1.2 主要试剂及仪器

1.3 方法

    1.3.1 E.coli的复苏及增菌

    1.3.2 半数致死量的测定

    1.3.3 菌株感染小鼠模型的建立及临床症状的观察

    1.3.4 脾脏指数的分析

    1.3.5 HE染色及透射电镜观察

    1.3.6 免疫组织化学染色

1.4 数据统计与分析

2 结 果

2.1 E.coli的复苏培养结果

2.2 半数致死量的测定

2.3 菌株感染小鼠模型的建立及临床症状的观察

2.4 脾脏指数

2.5 HE染色及透射电镜观察

    2.5.1 肝脏和肾脏病理变化

    2.5.2 肝脏和肾脏超微结构病变特征

2.6 免疫组织化学染色结果

3 讨 论

4 结 论

文章摘要:为探究撒坝猪源大肠杆菌（E.coli）高致病性毒力岛（HPI）诱导小鼠病理损伤的超微结构特征,本研究将实验室保存的E.coli HPI阳性株（HPI⁺）和E.coli HPI基因缺失株（^ΔHPI）进行复苏和培养,分别用E.coli HPI⁺、E.coli^ΔHPI菌株以腹腔接种的方式感染昆明小鼠,检测菌株的半数致死量(50%lethal dose,LD₅₀),通过HE染色和透射电镜观察并分析菌株对小鼠病理损伤的超微结构特征,利用免疫组织化学标记白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）阳性细胞在被感染小鼠肝脏和肾脏组织中的分布,以反映E.coli HPI⁺及E.coli^ΔHPI菌株所引起炎症水平的差异。结果显示,E.coli HPI⁺和E.coli^ΔHPI菌株的半数致死量分别为1×10^7.39和1×10^8.62 CFU/mL;HE染色显示,E.coli感染小鼠后,可见肝脏细胞肿胀、变性,肝窦淤血,肾脏间质淤血,肾小管上皮细胞变性脱落等病理变化;超微结构变化显示,肝脏细胞的完整形态消失,胞核呈不规则形态,线粒体畸形,粗面内质网上核糖体脱落,滑面内质网增生;多数肾小管上皮细胞出现胞核固缩,部分细胞核核仁边移、体积增大,足突融合,系膜细胞间隙变宽。此外,E.coli HPI⁺感染组小鼠于肝脏、肾脏的水肿现象较E.coli^ΔHPI菌株感染的小鼠更为明显。免疫组化结果显示,大肠杆菌感染小鼠后,IL-1β蛋白主要表达于肝细胞、中央静脉周围、肾间质细胞和肾小管上皮细胞,且E.coli HPI⁺感染组的IL-1β表达量高于E.coli^ΔHPI感染组。综上所述,撒坝猪源E.coli HPI能够调控E.coli对小鼠的致病性,HPI的调控作用可使E.coli对小鼠肝脏、肾脏造成的病变及超微结构变化更明显,并且能够增加小鼠的炎症反应。

文章关键词:大肠杆菌,高致病性毒力岛(HPI),致病性,白细胞介素-1β(IL-1β),

项目基金:国家自然科学基金项目(31660704、31260594),

论文作者:单春兰¹ 张博¹ 赵维薇² 王浩³ 杨伟³ 邓静³ 赵汝³ 高利波³ 肖鹏³ 吕龙宝⁴ 高洪³ 

作者单位:1. 云南农业大学动物科学技术学院 2. 云南农业大学食品科学技术学院 3. 云南农业大学动物医学院 4. 中国科学院昆明动物研究所 

论文DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2021.09.042

论文分类号: S852.61

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