《国际观察》
文题释义:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
1.1 设计
1.2 时间及地点
1.3 材料
1.3.1 实验动物
1.3.2 实验试剂、仪器
1.4 方法
1.4.1 小鼠骨髓间充质干细胞的分离和体外培养及诱导鉴定
1.4.2 细粒棘球蚴原头蚴的提取及活性检测
1.4.3 细粒棘球蚴对骨髓间充质干细胞增殖和Notch通路上游、下游相关蛋白及m RNA表达的影响
1.5 主要观察指标
1.6 统计学分析
2 结果Results
2.1 小鼠骨髓间充质干细胞的形态观察及诱导鉴定结果
2.2 细粒棘球蚴感染羊肝、原头蚴镜下观察及活性鉴定结果
2.3 骨髓间充质干细胞与细粒棘球蚴原头蚴共培养实验
2.4 CCK-8试剂盒测定各组骨髓间充质干细胞培养不同时间点的增殖情况
2.5 实时荧光定量PCR检测各组骨髓间充质干细胞培养不同时间点的Notch-1,Jagged-1和Hes-1 mRNA表达水平
2.6 Western blot检测各组骨髓间充质干细胞培养不同时间点的Notch-1,Jagged-1和Hes-1蛋白水平
3 讨论Discussion
文章摘要:背景:目前,国内外有关细粒棘球蚴与间充质干细胞之间相互作用影响的报道很少,细粒棘球蚴与干细胞增殖方面的研究目前还是空白。目的:探讨细粒棘球蚴对骨髓间充质干细胞增殖的影响及机制。方法:分离、培养C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,分为单独骨髓间充质干细胞组、Notch信号通路特异性抑制剂DAPT组、细粒棘球蚴原头蚴组、细粒棘球蚴原头蚴+特异性抑制剂DAPT组。培养1,2,3 d采用CCK-8法检测各组骨髓间充质干细胞增殖情况,Western blot、实时荧光定量PCR检测各组骨髓间充质干细胞中Notch信号通路相关Notch-1,Jagged-1,Hes-1蛋白及mRNA表达。结果与结论:(1)与单独骨髓间充质干细胞组相比,特异性抑制剂DAPT组细胞增殖受到抑制(P <0.05),细粒棘球蚴原头蚴组细胞增殖明显(P <0.05);与特异性抑制剂DAPT组相比,细粒棘球蚴原头蚴+特异性抑制剂DAPT组细胞增殖上调(P <0.05);(2)Notch-1,Jagged-1,Hes-1的蛋白及mRNA表达:特异性抑制剂DAPT组低于单独骨髓间充质干细胞组(P <0.05);细粒棘球蚴原头蚴组高于单独骨髓间充质干细胞组(P <0.05);细粒棘球蚴原头蚴+特异性抑制剂DAPT组高于特异性抑制剂DAPT组(P <0.05);(3)结果表明,细粒棘球蚴可通过Notch信号通路促进骨髓间充质干细胞的增殖,这一现象可能为细粒棘球蚴外囊的形成机制奠定理论基础,从而解释细粒棘球蚴感染宿主后如何获得免疫逃逸,甚至可能为细粒棘球蚴病的预防和早期诊断打开一个新的研究方向。
文章关键词:
论文分类号:R329.2
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