文章目录

1 材料与方法

1.1 临床腹泻样品及试验仔猪

1.2 主要试剂及仪器

1.3 病毒分离及鉴定

1.4 分离株致病性试验

1.5 样品处理

1.6 感染仔猪的临床症状观察及粪便排毒检测

1.7 感染仔猪的病毒血症及病毒分布

1.8 感染仔猪肠道组织病理学和免疫组织化学试验

1.9 数据统计分析

2 结 果

2.1 病毒分离鉴定

2.2 感染仔猪临床症状及排毒情况

2.3 感染仔猪的病毒血症及组织中分布

2.4 感染仔猪肠道组织病理学和免疫组织化学观察

3 讨 论

4 结 论

文章摘要:【目的】在从腹泻仔猪粪便中分离鉴定猪A群轮状病毒（Rotavirus group A,RVA）并了解其致病性。【方法】应用MA-104细胞从仔猪腹泻粪便中分离鉴定RVA,将其经口感染健康初生仔猪,观察其临床症状,并利用实时荧光定量PCR检测排毒、HE染色观察病理变化、免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）试验了解病毒分布。【结果】分离到1株可引起MA-104细胞明显细胞病变的G9P[23] RVA,命名为RVA/Pig-tc/CHN/SCJY-13/2017/G9P[23]（简称SCJY-13株）,病毒滴度为10^5.5 TCID₅₀/100μL。经口感染SCJY-13株的仔猪在感染后11 h出现腹泻,持续到感染后165 h完全恢复,其发病率为100%（7/7）,病死率为28.57%（2/7）。感染后8 h可从仔猪肛拭子检测到病毒核酸,直至感染后192 h,峰值出现在感染后24 h。感染后54 h各段小肠病毒载量达到最高,其中回肠中病毒载量最高,显著高于十二指肠、空肠（P<0.05）;HE染色和IHC检测结果显示,SCJY-13在感染仔猪小肠的绒毛及隐窝中大量聚集,尤其是回肠段;SCJY-13株感染引起十二指肠、空肠和回肠绒毛固有层大量淋巴细胞浸润、黏膜上皮细胞和肠绒毛尖端空泡变性、柱状细胞增多、绒毛断裂脱落等,以回肠段较严重。【结论】SCJY-13株能引起新生仔猪100%发病,其主要靶位区在回肠,感染后排毒时间长。本试验结果为猪RVA的致病性研究提供了一定的参考依据。

文章关键词:

项目基金: